چکیده:
مقدمه: سلول های بنیادی مزانشیمی (MSCs: Mesenchymal stem cells) با داشتن مزیت هایی نظیر قابلیت توان تمایزی و اعمال آثار پاراکرین در درمان بیماری های مختلف نقش دارند. لذا استفاده از MSCs به عنوان ابزاری در سلول درمانی، نیازمند استحصال موفق این سلول ها در کمترین زمان ممکن است.
مواد و روش ها: به همین منظور در این مطالعه MSCs از منابع مغز استخوان و چربی انسان استخراج شده و از نظر درصد موفقیت کشت و سرعت تخلیص مورد ارزیابی قرار گرفتند. برای اطمینان از اینکه سلول های استحصال شده MSCs هستند، مطالعه تمایز به سلول های چربی و سلول های استخوانی به وسیله رنگ آمیزی Oil Red O و Alizarin Red S و سنجش فعالیت آلکالین فسفاتازی انجام گرفت. همچنین سلول های جدا شده، از نظر نشانگرهای اختصاصی به وسیله فلوسایتومتری مورد بررسی قرار گرفتند.
نتایج: نتایج حاکی از آن بود که درصد موفقیت در جداسازی MSCs از بافت چربی بیشتر از بافت مغز استخوان بود و همچنین روند تخلیص در MSCs جدا شده از بافت چربی در مقایسه با MSCs جدا شده از مغز استخوان به مدت زمان کمتری نیاز دارد. همچنین نتایج ما موید این واقعیت بود که استحصال MSCs از بافت چربی از دهنده های مختلف کاملا تکرارپذیر بوده و وابسته به دهنده نیست لیکن این مساله در مورد MSCs مشتق از بافت مغز استخوان صادق نبود.
نتیجه گیری: در مجموع نتایج این تحقیق بیانگر این بود که بافت چربی در مقایسه با بافت مغز استخوان، به لحاظ درصد موفقیت در جداسازی اولیه سلول ها و همچنین سرعت تخلیص بعدی سلول ها، منبع مناسب تری برای استخراج MSCs می باشد.
Introduction: Mesenchymal stem cells (MSCs) exhibit multiple beneficial properties in treatment of various diseases through their differentiation capacity and secretion of paracrine signals. Therefore، using MSCs as a tool for cell therapy rely on the ability of harvesting a sufficient number of cells in a short time.
Methods: In this study، MSCs derived from bone marrow (BM) and adipose tissue (AD) were investigated in terms of success rate of culture and cell yields. To ensure that the isolated cells are MSCs، adipogenic and osteogenic differentiation study were performed by Oil Red O، Alizarin Red S and Alkaline Phosphatase assay، and specific surface markers expression examined by flow cytometry.
Results: The results showed that successful culture's rate of AD-MSCs were superior to BM-MSCs. AD-MSCs reached to confluency and passage in a shorter time (faster) and produced further amount of cells at a defined time. It was also demonstrated that the derivation of MSCs from adipose tissue were completely reproducible and not donor dependent rather than BM-MSCs.
Conclusion: In conclusion، with our protocol، adipose tissues are proposed the more appropriate source for derivation of MSCs in terms of percentage of cells successfully isolated and subsequent purification as compared to bone marrow.