تشخیص انواع مایعات زیستی باقیمانده در صحنۀ جرم به روش بررسی بیان mRNAهای خاص بافتی و انجام واکنش PCR مقالة

مؤلف: رعنایی پیرمردان، احسان ؛ سهیلا سهیلی، زهرا ؛

پژوهش های اطلاعاتی و جنایی پاییز 1399، سال پانزدهم - شماره 3 ، ب (Ministry of Science/ISC (‎24 صفحة - من 57 إلی 80 )

الکلمات المفتاحية: واکنش زنجیره ای پلیمراز تشخیص مایعات بدن ژنتیک قضایی RNA های پیام رسان RNA صحنه جرم تشخیص هـا واکنش PCR

خلاصة:

مقدمه: ترشحات زیستی همچون خون، بزاق و مایع منی جزء فراوان‌ترین نمونه‌های کشف شده از صحنۀ جرم می‌باشند. از اینرو یکی از ملزومات بررسی صحنۀ جرم، تشخیص به موقع و دقیق این نوع مایعات زیستی در محل وقوع جرم می باشد. هدف از این تحقیق، استفاده از روش های مولکولی بر پایه پروفایل بیانی mRNA جهت بررسی امکان شناسایی مایعات زیستی و ایجاد یک پروتکل مناسب برای انجام آن بود. روش‌ها: مایعات زیستی ( خون، بزاق و مایع منی) به صورت تازه و خشک شده در ویال و روی کاغذ و در بازه های زمانی یک و پنج ماه جمع آوری شدند. بعد از انتخاب نشانگرهای مناسب، برای هریک از نمونه‌های مورد نظر شرایط و پروتکل های استخراج RNA و PCR برای این نشانگرها بهینه شد. در نهایت به منظور ارزیابی این روش نمونه‌های حقیقی صحنۀ جرم نیز با این روش مورد بررسی قرار گرفتند. یافته‌ها: نتایج نشان داد که تکنیک ها از لحاظ کمی و کیفی جهت فرایندهای پایین دستی مناسب بوده و حتی پس از پنج ماه می توان RNA را از سطوح خشک بازیابی و جهت شناسایی مایعات به کار برد. نتیجه‌گیری: در این تحقیق شرایط استخراج RNA و واکنش PCR برای اینگونه مطالعات بهینه شده و چشم اندازی عملی در زمینه امکانات، تکنیکها و هزینه انجام کار مورد بررسی قرار گرفت که در نهایت استفاده از پتانسیل پروفایل mRNA را به عنوان یک جایگزین احتمالی تست‌های سرولوژیکی فراهم نماید.

ملخص الجهاز:

Kader and Ghai Nishimukai and Asano Kratzer Choi, van Kuijk, and 6. Kayser Shin اختصاصي نمونه هاي زيستي کشف شده از صحنه جرم است که برتري هاي خاص خود را نسبت به روش هاي مرسوم بيوشيميايي داشته باشد؛ از جمله اين برتري ها، مـي تـوان بـه اختصاصيت بيشتر، کاهش اتلاف نمونه در بررسي ها و انطباق بيشتر با روش هاي مطالعـه DNA در فرآيندهاي بعدي شناسايي نمونه ها از جمله تشخيص هويـت نمونـه هـا اشـاره کرد. از اين رو، در اين تحقيـق ، پس از انتخاب مارکرها و پرايمرهاي مناسب جهت تشخيص مايعات زيستي ، پروتکل هاي مناسب جهت استخراج RNA و انجام PCR در شرايط محيطي مختلف (نمونه هاي تازه و خشک شده ) و تا پنج ماه پس از نمونه گيري بهينـه شـده اسـت و شناسـايي نمونـه هـاي زيستي موردنظر در شرايط مختلف بر پايه روش بيان mRNAهاي خاص بافتي به منظور به کارگيري در آزمايشگاه هاي جنايي بهينه سازي شده است . از اين رو، در اين تحقيق نيز اساس روش شناسايي نمونه هـاي مورد نظر، استفاده از روش بيان mRNA خاص بـافتي بـوده اسـت کـه بـه طـور ويـژه و هدفمند براي نمونه هاي رايج صحنه جرم از جمله خون ، مايع مني و بزاق طراحـي شـده است . مهم ترين نکته قابل ذکر در اين پژوهش اين است کـه در ايـن تحقيـق روش هـاي خاص تخليص و استخراج RNA از نمونه هاي مختلف زيستي مورد بررسي قرار گرفت و با بهينه سازي مناسب روش تخليص سعي شد با کمتـرين امکانـات و بـدون وابسـتگي بـه کيت هاي گران قيمت ، استخراج RNAهاي مربوط به نمونه مورد نظر به خصـوص نمونـه - هاي خشک شده و نمونه هاي واقعي صحنه جرم با يک کيفيت مناسب جهـت شناسـايي امکان پذير شود. 2. Rio, Ares, Hannon and Zheng Nilsen 5.

استلام ملف الإرجاع :
(پژوهیار, , , )

تحميل
تحميل HTML

رابط قصير:

صفحة:

دخول / الاشتراک

تحتاج الدخول لعرض محتوى المقالة. إذا لم تكن عضوًا ، فتابع من الجزء الاشتراک.

دخول