چکیده:
سابقه و هدف: با وجود پیشرفت های گسترده در زمینه ی کشت سلول های بنیادی، هنوز انتخاب بهترین منبع سلولی کارآمد جهت تزریق، قابل تامل است. از آنجا که میزان بیان ژن های پرتوان، نشان دهنده ی درجه ی کارآمدی سلول های بنیادی است، در این تحقیق بیان برخی از ژن های پرتوان از جمله c-Myc، klf-4، oct4 و sox-2 در سلول های بنیادی به دست آمده از سه منبع بافت چربی، مغز استخوان و القایی، مورد مقایسه قرار گرفت.
مواد و روش ها: تحقیق به روش تجربی انجام گرفت. سلول های بنیادی القایی مورد استفاده در این تحقیق به صورت آماده تهیه شدند. پس از تهیه، جداسازی و کشت، سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان و چربی انسانی در پاساژ سوم، مارکرهای سطحی آنها با تکنیک فلوسیتومتری مورد ارزیابی و تایید قرار گرفت. پس از طراحی پرایمرهای مناسب ژن های c-Myc، klf-4، oct4 و sox-2 و همچنین ژن GAPDH (بعنوان ژن کنترل)، بیان ژن های فوق در سه منبع سلول های بنیادی توسط real time PCR مورد مقایسه قرار گرفت.
یافته ها: بیان ژن c-Myc در سلول های بنیادی چربی بیشترین مقدار را به خود اختصاص داد و بعد از آن به ترتیب، سلول های بنیادی القایی و مغز استخوان قرار گرفتند. ژن klf-4 در سلول های بنیادی مشتق از چربی و سلول های القایی، تقریبا به یک میزان بود و اختلاف معناداری با یکدیگر نداشتند و سلول های مغز استخوان کمترین میزان را به خود اختصاص دادند. سلول های مغز استخوان، بیشترین میزان بیان oct که مهمترین مارکر سلول های بنیادی جنینی است را از خود نشان داد. پس از آن سلول های القایی و سلول های چربی، بدون اختلاف معنادار نسبت به یکدیگر، در رتبه های بنمودعدی قرار گرفتند. بیان ژن sox-2 در سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان، بیش از دو گروه دیگر بود.
نتیجه گیری: سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان در مقایسه با سلول های بنیادی القایی و سلول های بنیادی مشتق از چربی، منبع مناسب تری در کاربردهای سلول درمانی می باشند.
Background and Aim: Regards to limitations to the use of embryonic stem cells، scientists created embryonic-like stem cells using reprogramming somatic cells by over expression of OCT4، klf-4، c-Myc and SOX2- genes (reprogramming markers). Considering the benefits of mesenchymal stem cells derived bone marrow and adipose tissue are mentioned today، the present study was proposed to comparison of expression of reprogramming genes of induced pluripotent stem (ips) cells and mesenchymal stem cells derived bone marrow and adipose tissue.
Materials and Methods: After preparation، isolation and culture of human mesenchymal stem cells derived bone marrow and adipose tissue and iPS cells، their reprogramming genes OCT4، klf-4، c-Myc and SOX2- were assessed by real time PCR in third passage.
Results: Oncogene c-Myc expression in adipose derives stem cells was the highest compare to the other group. Also Oncogene c-Myc expression in iPS cells was higher than bone marrow stem cells. Bone marrow stem cells were the lowest to klf4 expression. Expression of this gene in adipose stem cells was the same as described by iPS cells and there was no significant difference between them. Bone marrow stem cells showed the highest expression of OCT4. There was no significant difference between bone marrow and adipose stem cells. SOX-2 gene expression in bone marrow stems cells was significantly higher than the other groups.
Conclusion: Bone marrow stem cells in terms of OCT and c-Myc expression genes are the best source compare to adipose and iPS cells.