چکیده:
مقدمه: ژلاتین از کلاژن پوست و استخوان جانوران بدست میآید و درصنایع غذایی، داروسازی، لوازم آرایشی و بهداشتی بهطور وسیع مورد استفاده قرار میگیرد. با توجه به اهمیت حلال بودن ژلاتین مصرف شده در این محصولات، تولید و عرضه ژلاتین حلال از نظر تجارت جهانی حائز اهمیت است. امروزه حلیت محصولات ژلاتینی تنها از نظر منشا خوک یا گاو کنترل میشود، ولی در مواردی که منشا کپسول یا مکملها از ژلاتین ماهی و آبزی باشد، تشخیص آنها صورت نمیگیرد. روش کار: با استفاده از بانکهای اطلاعاتی و مطالعات بیوانفورماتیکی، پرایمرهای اختصاصی برای تیلاپیا، سالمون، کوسه و میگو طراحی شدند. سپس بهینهسازی روش PCR انجام شد. نهایتاً DNA استخراج شده از کپسولها، کلاژن و مکملها با پرایمرهای اختصاصی هرگونه تکثیر و بر روی ژل آگارز رؤیت شد. یافتهها: واکنش PCR با پرایمرهای اختصاصی تیلاپیا، سالمون، کوسه و میگو به ترتیب باندهای 113، 122، 200 و 132 جفتبازی را روی ژل آگارز نشان داد. اختصاصیت، پایداری و تکرارپذیری روش برای هر جفت پرایمر تائید شد. سپس PCR با DNA- های استخراج شده از کپسولهای ژلاتینی و کلاژن نیز منشا آبزیان را تائید کرد. نتیجه: در این مطالعه برای اولین بار شناسایی منشا کلاژن و کپسولهای ژلاتینی با استفاده از پرایمرهای اختصاصی تیلاپیا، سالمون، کوسه و میگو با روش PCR صورت گرفت. نتایج نشان داد پرایمرهای اختصاصی قادر به تکثیر باند مورد انتظار و شناسایی منشا میباشند. لذا با این روش میتوان در مدتزمان کوتاهی حلیت موارد مذکور را قبل از ورود به کشور بررسی، تائید یا رد کرد.
Introduction: Gelatin is made from the collagen of the skin and bones of animals and is widely used in food, pharmaceutical, cosmetics. Given the importance of the halal status of gelatin used in these products, the production and supply of halal gelatin are important in terms of global trade. Today, the solubility of gelatinous products is controlled for the origin of pigs or cattle, but in cases where the capsules or supplements are from fish and aquatic gelatin, they are not detected. Methods: Specific primers for tilapia, salmon, sharks and shrimp were designed using databases and Bioinformatics studies. Then the PCR method was optimized. Finally, the DNA extracted from the capsules, collagen and supplements were amplified with specific primers and displayed on agarose gel. Results: PCR reaction with specific primers of tilapia, salmon, shark and shrimp showed 113, 122, 200 and 132 bp bands on agarose gel, respectively. The specificity, stability and repeatability of the method were confirmed for each pair of primers. PCR with DNA extracted from gelatin and collagen capsules also confirmed the origin of aquatic animals. Conclusion: In this study, for the first time, the origin of collagen and gelatin capsules were identified using specific primers of tilapia, salmon, shark and shrimp and PCR. The results showed that specific primers are able to amplify the expected band and identify the source. Therefore, with this method, the solubility of the mentioned cases can be checked, approved or rejected in a short period of time before entering the country.