خلاصة:
استافیلوکوکوس ارئوس یکی از عوامل اصلی بیماری ورم پستان گاوی میباشد. این باکتری گستره وسیعی از عفونتها و بیماریهای تهدیدکننده زندگی را در انسان ایجاد مینماید. عوامل حدت مختلفی در بیماریزایی این باکتری نقش دارند یکی از مهمترین فاکتورهای حدت استافیلوکوکوس ارئوس قابلیت تشکیل بیوفیلم میباشد. این باکتری قادر به تولید پلیساکاریدها و فاکتورهای پروتئینی چسبیده به سطح است که منجر به تولید بیوفیلم میشود. در این مطالعه به منظور بررسی میزان آلودگی استافیلوکوکوس ارئوس در شیرهای خام، از 120 نمونه شیر خام عرضهشده در سطح شهرستان سنندج نمونهبرداری و با روشهای متداول میکروبیولوژی کشتداده شده و نتایج با استفاده از PCR مورد ارزیابی قرار گرفت. به منظور تشخیص تاییدی جدایهها به عنوان استافیلوکوکوس ارئوس با استفاده از PCR ژن اختصاصی nuc و برای شناسایی ژنهای عامل تولیدکننده بیوفیلم fnbA، clfaB، icaD و icaA از پرایمرهای اختصاصی مربوط به هر ژن با استفاده از روش Multiplex PCR استفاده گردید. با توجه به نتایج حاصل از کشت میکروبی و تایید آن با روش مولکولی، 49 جدایه بوسیله آزمایشهای بیوشیمیایی استاندارد و نیز تکثیر ژن ترمونوکلئاز اختصاصی گونه (nuc) بهعنوان استافیلوکوکوس ارئوس شناسایی شدند. بر اساس نتاییج حاصل از Multiplex PCR ژنهای مولد بیوفیلم (38/69%)fnbA، (6/32%) clfaB، (77/38%) icaD و (18/59%) icaA در جدایهها تشخیص داده شد. نتایج حاکی از آلودگی بالای شیرخام عرضهشده در سطح شهرستان سنندج به استافیلوکوکوس ارئوس و نیز قابلیت بالای جدایهها در تشکیل بیوفیلم میباشند.
Staphylococcus aureus is a major cause of bovine mastitis. Several virulence factors are involved in mastitis. One of the important virulence factors is the ability of the bacterium to produce biofilms. These bacteria are capable of producing polysaccharides and proteinaceous substances attached to the surfaces، leads to biofilm formation. In this study، a total of 120 raw milk samples was obtained from Kurdistan province and analyzed for the presence of S. aureus. The presence of S. aureus was assessed by conventional culture method and confirmed by PCR assay. For this، nuc gene was exploited as the specific target sequence to detect S. aureus. Moreover، Multiplex PCR was used to identify the presence of clfaB، fnbA، icaD and icaA genes which encode biofilm formation. Based on results، S. aureus was found in 49 (40.83%) of the samples. The frequency of each of the genes was determined as 69.38%، 32.6%، 38.77%، and 59.18 for fnbA، clfaB، icaD and icaA، respectively. Results revealed a high contamination rate of raw milks with S. aureus، and the ability of the isolates to form biofilms.
ملخص الجهاز:
"در این مطالعه به منظور بررسی میزان آلودگی استافیلوکوکوس ارئوس در شیرهای خام، از 120 نمونه شیر خام عرضهشده در سطح شهرستان سنندج نمونهبرداری و با روشهای متداول میکروبیولوژی کشتداده شده و نتایج با استفاده از PCR مورد ارزیابی قرار گرفت.
به منظور تشخیص تاییدی جدایهها به عنوان استافیلوکوکوس ارئوس با استفاده از PCR ژن اختصاصی nuc و برای شناسایی ژنهای عامل تولیدکننده بیوفیلم fnbA، clfaB، icaD و icaA از پرایمرهای اختصاصی مربوط به هر ژن با استفاده از روش Multiplex PCR استفاده گردید.
استافیلوکوکوس ارئوس بهعنوان یکی از مهمترین عوامل بیماریزا میتواند در شیر و فراوردههای آن تکثیر پیدا کرده و منجر به بیماریزایی در انسان شود از سوی دیگر میتواند از طریق تولید بیوفیلم نقش مهمی در ایجاد بیماری مزمن ورم پستان ایفا نماید (Kumar and Anand, 1998).
(رجوع شود به تصویر صفحه) شکل 2- نتایج PCR مربوط به سویههای استافیلوکوکوس ارئوس دارای ژن icaA، icaB، icaC و icaD بحث و نتیجهگیری دسته وسیعی از میکروارگانیسمهای بیماریزا میتوانند با تولید بیوفیلم، منبع مهمی برای گسترش عوامل عفونتزا در روی سطوح مورد تماس با انواع مواد غذایی باشند که در این میان استافیلوکوکوس ارئوس به عنوان یکی از مهمترین عوامل بیماریزا میتواند در شیر و فراوردههای آن تکثیر پیدا کرده و منجر به بیماریزایی در انسان گردد و از سوی دیگر میتواند از طریق تولید بیوفیلم نقش مهمی در ایجاد بیماری مزمن ورم پستان گاوی داشته باشد.
در مطالعهای که توسط دوران و همکاران در سال 2010 روی جدایههای استافیلوکوکوس ارئوس حاصله از زخمهای جراحی به منظور شناسایی ژنهای بیوفیلم انجام گردید، 69 جدایه از 88 جدایه مورد مطالعه (4/78 درصد) حاوی ژن cna و 86 جدایه (7/97%) حاوی ژن fnbA بودهاند."